Diesel sinh học là nhiên liệu tái tạo có tính chất tương đương dầu diesel, nhưng được sản xuất từ dầu thực vật hoặc mỡ động vật thay vì dầu mỏ, về mặt hóa học là methyl este của axít béo. Ngày 10 tháng 8 được chọn là Ngày Diesel sinh học Quốc tế để kỷ niệm sự kiện động cơ Diesel của Rudolf Diesel tự chạy lần đầu tiên vào năm 1893. Quá trình sản xuất chính là pha khoảng 10% methanol vào dầu thực vật với chất xúc tác ở nhiệt độ 60°C, sau đó tách glyxêrin để tạo ra nhiên liệu có độ nhớt thấp hơn, có thể dùng trực tiếp cho động cơ mà không cần cải biến. Các loại phổ biến gồm RME (từ cải dầu), PME (từ dầu cọ/dừa) và SME (từ đậu nành/hướng dương), tuân theo tiêu chuẩn DIN EN 14214. Tuy nhiên, diesel sinh học có nhược điểm lớn là dễ phá hủy ống dẫn nhiên liệu và vòng đệm cao su, đồng thời có thể lẫn vào nhớt động cơ gây hao mòn, và không bền khi lưu trữ lâu do bị oxy hóa. Vì vậy, nhiều nhà sản xuất xe không cho phép sử dụng loại nhiên liệu này trên các dòng xe hiện đại, đặc biệt là những xe ít vận hành.